Zestawy VerteKIT

Zestaw przeznaczony do syntezy pierwszej nici cDNA (complementary DNA). W jego skład wchodzą: Odwrotna transkryptaza Verte MMLV, bufor reakcyjny, mieszanina 1,5mM dNTPs, woda wolna od RNA-z oraz opcjonalnie startery reakcji. Synteza pierwszej nici cDNA odbywa się za pomocą odwrotnej transkryptazy Verte MMLV enzymu bedącego produktem genu pol mysiego wirusa leukemii Moloneya. Dzięki swojej aktywności Polimerazy DNA zależnej od RNA Verte MMLV pozwala na synteze cDNA o długości do 5000pz. W przciwieństwie od odwrotnej transkryptazy AMV (Avian Mieloblastosis Virus) odwrotna transkryptaza M-MLV posiada tylko szczątkową aktywności RNAazy H.

ZestawVerteKIT nie zawiera starterów (podstawowy) lub opcjonalnie w jego skład wchodzą startery oligo(dT)15 lub random primers. VerteKIT (podstawowy) przeznaczony jest do syntezy cDNA przy użyciu starterów specyficznych dla określonych sekwencji w RNA.

Startery specyficzne - pozwalają na bardzo selektywne przepisanie nici mRNA na cDNA, najczęściej znajdują zastosowane w diagnostyce molekularnej.

Startery oligo(dT)15 - pozwalają na syntezę cDNA od 3’ końca mRNA - poli(A). Wygodne w zastosowaniu umożliwiają synteze cDNA na matrycy mRNA, którego długość nie przekracza 5 k.p.z. Otrzymane cDNA można przeznaczyć do dalszego zastosowania w reakcji syntezy DNA lub do hybrydyzacji typu Northern blot.

6-nukleotydowe startery losowe (random primers) - są krótkie i niespecyficznie wiążą się z mRNA na całej jego długości. Idealne w zastosowaniu w przypadku trudnych matryc, w których struktury drugorzędowe utrudniają proces przepisania mRNA na cDNA. 64 możliwych 6-nukleotydowych kombinacji starterów powoduje przepisanie do komplementarnego DNA dowolnej matrycy RNA.

Skład zestawów obliczony jest na przeprowadzenie 100 reakcji:

- protokół reakcji w formacie pdf.

- protokół reakcji w formacie zip

opcjonalnie zestawy oligo(dT)15 lub random primers zawierają startery reakcji RT:

Proponujemy:

UWAGA! ograniczenia w zastosowaniu: Ten produkt został zaprojektowany i wykonany wyłącznie do celów badawczych. Nie został przetestowany w kierunku zastosowania do celów diagnostycznych i do bezpośredniej produkcji leków oraz do celów związanych z produkcją leków.