HotTaq Polimeraza DNA NOWOŚĆ!

Do niedawna stosownie reakcji hot-start było uciążliwa, bardzo czasochłonna i skutkowało sporym ryzykiem kontaminacji. Zastosowanie HotTaq polimerazy DNA w tego typu reakcjach pozwala przezwyciężyć wiele trudności i uzyskać czysty i specyficzny produkt w reakcji amplifikacji DNA.

Polimeraza HotTaq jest specjalnie zmodyfikowaną wersją termostabilnej Taq Polimerazy DNA. Enzym jest całkowicie nieaktywny w temp 20-25C a jego aktywacja następuję w temp. >550C.

Funkcje układu hot-start w tym przypadku Polimerazy HotTaq spełniają specjalnie zmodyfikowane oligonukleotydy. Inhibicja enzymu jest całkowicie odwracalna. Zastosowanie tego typu techniki hot-start pozwala na znaczne zwiększenie specyficzności reakcji amplifikacji, co ma szczególnie duże znaczenie w przypadku zastosowania Taq polimerazy do celów diagnostycznych.

HotTaq Polimeraza DNA jest termostabilnym enzymem o masie w przybliżeniu 94kDa. Enzym uzyskuje maksymalną aktywność się w temp. 70-74 C (może również pracować w stosunkowo niskich temperaturach tzn. od 25C), czas półtrwania w temp. 94C wynosi w przybliżeniu 45 min.

Enzym prowadzi syntezę DNA w kierunku 5′ - ->3′ w obecności jonów Mg 2+ i przy odpowiednim stężeniu dNTPs. Produkt otrzymany z wykorzystaniem Hot Taq Polimerazy DNA, posiada na obu końcach nieznaczną ilość dodatkowo włączonej zasady (A). Pozwala to na efektywne klonowanie bez dodatkowych etapów reakcji.

HotTaq Polimeraza DNA posiada aktywność egzonukleazy 5′- ->3′ przejawiającą się wyłącznie podczas pracy na dsDNA. Obecność aktywności 5′ - ->3′ czyni ten enzym bardzo efektywnym w reakcjach amplifikacji DNA z sondami molekularnymi. Enzym ten został zaprojektowany specjalnie do wykorzystania w technice real-time.

Maksymalna długość produktu, który można otrzymać z wykorzystaniem AllegroTaq Polimerazy DNA wynosi w przybliżeniu 5000-6000 p.z.

UWAGA! HotTaq polimeraza DNA do pełnej aktywacji wymaga 5 min denaturacji wstępnej.

Bufor reakcyjny z Mg 2+ (x10): 700 mM Tris-HCl pH 8.6 / 25 0C, 166 mM (NH4) 2SO 4, 25mM MgCl 2

Bufor do przechowywania (x10): 20mM Tris-HC pH 8.0, 1mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100mM KCl, 0.5% NonidetTM P40, 0.5% TweenTM 20, 50% glicerol.

Definicja jednostki: Jedną jednostkę enzymu definiuje się jako ilość enzymu, niezbędną do przeprowadzenia reakcji inkorporacji 10 nmoli dezoksyrybonukleotydów dNTPs do frakcji polinukleotydowej zabsorbowanej na nośniku stałym, w czasie 30 min w temperaturze 74°C.

Stężenie: 2,5u/ul

Przechowanie: - 20C Przewóz w specjalnych warunkach nie jest niezbędny.

HotTaq Polimeraza DNA - karta produktu w formacie pdf.

HotTaq Polimeraza DNA - MSDS w formacie pdf.

HotTaq Polimeraza DNA - karta produktu w formacie zip

UWAGA! ograniczenia w zastosowaniu: Ten produkt został zaprojektowany i wykonany wyłącznie do celów badawczych. Nie został przetestowany w kierunku zastosowania do celów diagnostycznych i do bezpośredniej produkcji leków oraz do celów związanych z produkcją leków.