AmpliKit VivaTaq - Zestaw składający się z polimerazy DNA VivaTaq (5u/u) i trójfosforanów dezoksyrybonukleotydów (dNTPs). Polimeraza VivaTaq jest chemicznie zmodyfikowaną wersją Taq polimerazy DNA umożliwiającej prowadzenie rakcji amplifikacji DNA w wariancie "hot-start". Użycie VivaTaq polimerazy DNA w znacznym stopniu podnosi specyficzność reakcji. Enzym pozwala zwiększyć wyjściową ilość produktu, zmniejszyć niespecyficzną amplifikację i w rezultacie otrzymać produkt często tam, gdzie w warunkach zwyczajnej reakcji amplifikacji nie jest to możliwe. Źródłem pochodzenia VivaTaq Polimerazy DNA jest szczep Thermus aquaticus.
Enzym ten wykazuje maksymalną aktywność w temp. 70-74°C , czas półtrwania w 94°C wynosi w przybliżeniu 45 min. VivaTaq Polimeraza prowadzi syntezę DNA w kierunku 5′ - ->3′ w obecności jonów Mg2+ i przy odpowiednim stężeniu dNTPs .
VivaTaq Polimeraza DNA posiada również aktywność egzonukleazy 5′-->3′ która wyłącznie ujawnia się podczas pracy enzymu na dsDNA. Obecność aktywności 5′ - ->3′ egzonukleazy umożliwia wykorzystanie go w reakcji amplifikacji DNA metodą real time.
Otrzymany produkt reakcji , może posiadać na końcach dodatkową zasadę (A) .Jest to szczególnie przydatne podczas późniejszej reakcji klonowania, natomiast w przypadku konieczności otrzymywania produktów bez dodatkowej zasady (A), polecamy polimerazy DNA izolowane z archeobakterii - PrestoPfu lub HiFiTaq.
Maksymalna długość fragmentu, jaką można otrzymać z wykorzystaniem VivaTaq Polimerazy DNA wynosi w przybliżeniu 5000 – 6000 p.z.
UWAGA! W celu przeprowadzenia pełnej aktywacji VivaTaq polimerazy DNA zalecamy wstępną denaturację w temp. 94°C wydłużyć do 10-15 min. („hot-start”).
Enzym z czasem traci aktywność, więc powinien zostać wykorzystany w ciągu 12 miesięcy od daty sprzedaży.
Przechowywanie: - 20°C Przewóz w specjalnych warunkach nie jest niezbędny.
Bufor reakcyjny z Mg 2+ (x10): 700 mM Tris-HCl, pH 8.3/25°C, 166 mM (NH4)2SO4, 25 mM MgCl2
Bufor do przechowywania (x10): 20mM Tris-HCl (pH 8.0), 1mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100mM KCl, 0.5% Nonidet TM P40, 0.5% Tween TM 20, 50% glicerol.
Definicja jednostki: Jedną jednostkę enzymu definiuje się jako ilość enzymu, niezbędną do przeprowadzenia reakcji inkorporacji 10 nmoli dezoksyrybonukleotydów dNTPs do frakcji polinukleotydowej zabsorbowanej na nośniku stałym, w czasie 30 min w temperaturze 74°C.
Stężenie: 5u/ul
Proponujemy dwa rodzje zestawów AmpliKIT VivaTaq:
AmpliKIT VivaTaq (nr kat. HS500):
Skład zestawu: Amplikit #HS500 |
VivaTaq Polimeraza DNA |
500u, 5u/u |
dNTPs |
50ul 100mM dATP, 50ul 100mM dTTP, 50ul 100mM dCTP, 50ul 100mM dGTP |
lub dNTPs (opcjonalnie) |
200ul mieszaniny każdego z nukleotydów w stężeniu 25mM |
bufor reakcyjny VivaTaq z 25mM MgCl2 (10x) |
2ml |
25mM MgCl2 |
1mL |
AmpliKIT VivaTaq (nr kat. HS1000):
Skład zestawu: Amplikit #HS1000 |
VivaTaq Polimeraza DNA |
1000u, 5u/u |
dNTPs |
100ul 100mM dATP, 100ul 100mM dTTP, 100ul 100mM dCTP, 100ul 100mM dGTP |
lub dNTPs (opcjonalnie) |
400ul mieszaniny każdego z nukleotydów w stężeniu 25mM |
bufor reakcyjny VivaTaq z 25mM MgCl2 (10x) |
4ml |
25mM MgCl2 |
1mL |
Viva Taq Polimeraza DNA - karta produktu w formacie pdf.
VivaTaq Polimeraza DNA - karta produktu w formacie zip
VivaTaq Polimeraza DNA - prowadzenie reakcji syntezy DNA PDF 619kb