AmpliKit HiFiTaq -zestaw do amplifikacji DNA z HiFiTaq polimerazą DNA, będącą mieszaniną polimeraz Taq i Pfu oraz trójfosforany dezoksyrybonukleotydów (dNTPs). Umożliwia przeprowadzenie wysokowydajnej reakcję syntezy DNA. Idealny w przypadku prowadzenia reakcji amplifikacji na długich i trudnych matrycach bogatych w GC.

HiFiTaq Polimeraza DNA jest specjalnie dobraną mieszaniną polimeraz DNA pochodzących ze szczepów bakterii hipertermofilnych Pyrococcus furiosus i Thermus aquaticus. mającą na celu zwiększenie efektywności reakcji amplifikacji DNA i zmniejszenie ilości wprowadzanych błędów przez Taq polimerazę DNA. Polimeraza HifiTaq uzyskuje maksymalną aktywność się w temp. 70-74°C (Uwaga! enzym jest aktywny również w relatywnie niskich temp. tzn. od 25°C), czas półtrwania w temp. 94°C wynosi w przybliżeniu 45 min. Enzym prowadzi syntezę DNA w kierunku 5′ - ->3′ w obecności jonów Mg 2+ i przy odpowiednim stężeniu dNTP.

HiFiTaq polimeraza również niewielką aktywność egzonukleazy 3′->5′ (tak zwaną "aktywność kontrolną” - proofreading activity).

Obecność aktywności egzonukleazy 3′->5′ powoduje, znaczne zwiększenie efektywności w reakcjach amplifikacji DNA w stosunku dozwykłej polimerazy Taq. W optymalnych warunkach działania Polimeraza HiFiTaq wprowadza znacznie mniejszą ilość błędów w porównania z polimerazą Taq.

Produkt, otrzymany z wykorzystaniem HiFiTaq , posiada na obu końcach nieznaczną ilość dodatkowo włączonej zasady (A). Pozwala to na efektywne klonowanie bez przeprowadzania dodatkowych etapów reakcji.

HiFiTaq Polimeraza DNA posiada również aktywność egzonukleazy 5′ - ->3′ przejawiającą się wyłącznie podczas pracy na dsDNA. Obecność aktywności 5′ - ->3′ czyni enzym bardzo efektywnym w reakcjach amplifikacji DNA metodą real-time z sondami molekularnymi.

Maksymalna długość produktu, który można otrzymać z wykorzystaniem HiFiTaq Polimerazy DNA wynosi w przybliżeniu 10-12 k.p.z.

Ważna właściwość: Polimieraza HiFiTaq nie jest enzymem, przeznaczonym dla wysokodokładnej syntezy DNA (chociaż dokładność syntezy przy użyciu tego enzymu jest wyższa w porównaniu ze zwykłą Taq DNA Polimerazą około 6x). W razie konieczności prowadzenia bardzo dokładnej syntezy DNA proponujemy zastosowanie PrestoPfu Polimerazy DNA.

Bufor reakcyjny z Mg 2+ (x10): 700 mM Tris-HCl, pH 8.6 / 25°C, 166 mM (NH4) 2SO4, 25 mM MgCl2

Bufor do przechowywania (x10): 20mM Tris-HCl (pH 8.0), 1mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100mM KCl, 0.5% Nonidet P40, 0.5% Tween 20 and 50% glycerol.

Stężenie polimerazy: 5u/ul

Definicja jednostki: Jedną jednostkę enzymu definiuje się jako ilość enzymu, niezbędną do przeprowadzenia reakcji inkorporacji 10 nmoli dezoksyrybonukleotydów dNTPs do frakcji polinukleotydowej zabsorbowanej na nośniku stałym, w czasie 30 min w temperaturze 74°C.

Przechowanie: - 20°C Przewóz w specjalnych warunkach nie jest niezbędny.

HiFiTaq Polimeraza DNA - karta produktu w formacie pdf.

HiFiTaq Polimeraza DNA - karta produktu w formacie zip

Proponujemy dwa zestawy AmpliKIT HiFiTaq w skład których wchodzi Polimeraza DNA i zestaw dNTPs:

AmpliKi HF500:

AmpliKi HF1000:

Produkt	nr kat	Ilość	sklep internetowy
AmpliKit HiFITaq 5u/ul	HF 500	500u/4 x 50ul 100mM
AmpliKit HiFiTaq DNA 5u/ul	HF 1000	1000u/4x100ul 100mM